【摘 要】
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目的 观察环状RNA hsa_circ_0023404对人骨关节炎(OA)软骨细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的机制.方法 收集10例行膝关节置换术的OA患者的关节软骨,分离软骨细胞并进行传代培养.将人OA软骨细胞分为三组,siRNA组、NC组分别转染hsa_circ_0023404 siRNA、对照siRNA,Ctrl组未行转染,作用48 h.采用实时荧光定量PCR法检测人OA软骨细胞、人正常软骨细胞及三组hsa_circ_0023404 siRNA相对表达量,CCK-8法观察三组细胞增殖情况(以光密
【机 构】
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河北省儿童医院成人内科,石家庄050031;河北省儿童医院泌尿外科;石家庄市第三医院老年病科;石家庄市第三医院检验科
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目的 观察环状RNA hsa_circ_0023404对人骨关节炎(OA)软骨细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的机制.方法 收集10例行膝关节置换术的OA患者的关节软骨,分离软骨细胞并进行传代培养.将人OA软骨细胞分为三组,siRNA组、NC组分别转染hsa_circ_0023404 siRNA、对照siRNA,Ctrl组未行转染,作用48 h.采用实时荧光定量PCR法检测人OA软骨细胞、人正常软骨细胞及三组hsa_circ_0023404 siRNA相对表达量,CCK-8法观察三组细胞增殖情况(以光密度值表示),流式细胞术观察三组细胞凋亡情况(以细胞凋亡率表示),ELISA法检测三组细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,Western blotting法检测三组细胞JAK-3、STAT-3蛋白相对表达量.结果 人OA软骨细胞与正常软骨细胞hsa_circ_0023404相对表达量分别为2.77±0.25、1.00±0.10,二者比较P<0.05.siRNA组、NC组、Ctrl组细胞hsa_circ_0023404相对表达量分别为0.17±0.02、0.98±0.09、1.00±0.09,siRNA组明显低于NC组、Ctrl组(P均<0.01).siRNA组细胞光密度值均高于NC组、Ctrl组,细胞凋亡率均低于NC组、Ctrl组(P均0.05).siRNA组细胞上清液IL-6、IL-8、TNF-α水平及细胞JAK-3、STAT-3蛋白相对表达量均低于Ctrl组、NC组(P均0.05).结论 人OA软骨细胞中hsa_circ_0023404表达异常升高,下调hsa_circ_0023404表达可促进人OA软骨细胞增殖、抑制细胞凋亡,其机制可能与抑制炎症因子分泌及JAK/STAT信号通路有关.
其他文献
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目的 观察长链非编码RNA(lncRNA)生长停滞特异性转录本5(GAS5)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)软骨分化的影响,并探讨其机制是否与Notch通路有关.方法 分离、培养大鼠BMSCs,并经倒相差显微镜观察细胞形态及流式细胞仪检测表面标志物表达鉴定证实.将第3代BMSCs分为对照组、p-EGFP-C1组(转染p-EGFP-C1空载体质粒)、p-EGFP-C1-lncRNA GAS5组(转染p-EGFP-C1-lncRNA GAS5过表达质粒)、p-EGFP-C1-lncRNA GAS5+DAPT组
目的 探讨骨关节炎(OA)大鼠软骨组织中生物钟基因及蛋白的表达变化.方法 取雄性SD大鼠24只,将其随机均分为正常对照组、模型组、盐酸氨基葡萄糖组.模型组、盐酸氨基葡萄糖组用Hulth法制作OA模型.正常对照组、模型组均给予生理盐水3 mL/d灌胃,盐酸氨基葡萄糖组给予盐酸氨基葡萄糖25 mg/(kg·d)灌胃,每天1次.连续干预28 d,将大鼠麻醉后用采血针行心脏取血脱颈椎处死,将造模部位关节取出.用HE染色法观察膝关节软骨组织病理变化,用Mankin\'s评分评价软骨组织破坏情况,用PCR检测软骨
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目的 探讨桃仁红花煎对妊娠期糖尿病(GDM)大鼠及其子代结局的影响与机制.方法 选择40只SPF级SD雌性大鼠、80只SPF级SD雄性大鼠.按照随机数字表法将40只雌性大鼠分为A、B、C、D组各10只,于动情期将雌性与雄性大鼠按1:2合笼,用阴道涂片法确认雌性大鼠妊娠.妊娠第5天,B、C、D组在尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)制备GDM模型,A组尾部注射等体积枸橼酸—磷酸氢二钠缓冲液.C组于建模当日用桃仁红花煎10 g/kg灌胃,D组用二甲双胍200 mg/kg灌胃,A、B组给予同体积生理盐水灌胃,每日1次
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