【摘 要】
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目的:构建并鉴定携带人NT-3基因的逆转录病毒载体以及稳定的包装细胞系.方法:用DNA重组技术将人NT-3定向克隆入逆转录病毒载体pLXSN,并用限制性内切酶进行酶切鉴定;磷酸钙转
【机 构】
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西安交通大学第二医院妇产科,西安交通大学医学院神经科学中心,西安华广生物有限公司
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目的:构建并鉴定携带人NT-3基因的逆转录病毒载体以及稳定的包装细胞系.方法:用DNA重组技术将人NT-3定向克隆入逆转录病毒载体pLXSN,并用限制性内切酶进行酶切鉴定;磷酸钙转染方法将重组的逆转录病毒转染入包装细胞系PA317,G418筛选建立稳定产病毒的细胞株.结果:构建的重组逆转录病毒载体可以被限制性内切酶EcoR I和BamHI切开,电泳分离显示两条阳性条带,分别出现于0.8kb和5.9kb处;重组载体转染包装细胞,经G418筛选,可形成抗性克隆,并测得病毒滴度为4×105cfu/ml
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