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目的
评价肾缺血再灌注损伤小鼠肾纤维化时pH域磷酸络氨酸结合域和亮氨酸拉链基元1(APPL1)表达的变化。
方法雄性C57BL/6小鼠24只，8周龄，体重20～25 g，采用随机数字表法分为2组(n＝12)：假手术组(S组)和肾缺血再灌注组(I/R组)。I/R组采用双侧夹闭肾蒂30 min后恢复肾脏灌注的方法制备肾缺血再灌注损伤模型。于再灌注2 d时随机取6只小鼠，取静脉血样检测血清BUN和Scr浓度，然后处死小鼠取肾组织，HE染色后光学显微镜下观察肾小管坏死情况，并采用半定量病理评估法进行肾小管损伤评分。于再灌注14 d时随机处死6只小鼠，取肾组织，采用天狼星红苦味酸染色法评估肾纤维化程度，分别采用Western blot法和免疫荧光法测定肾组织胶原蛋白1、纤连蛋白和α-平滑肌动蛋白的表达水平。分别于再灌注2和14 d时，采用Western blot法测定肾组织APPL1表达，采用RT-PCR法检测肾组织APPL1 mRNA表达。
结果与S组比较，I/R组再灌注2 d时血清BUN和Scr的浓度、肾小管损伤评分和肾纤维化程度升高，再灌注14 d时肾组织胶原蛋白1、纤连蛋白和α-平滑肌动蛋白的表达上调，再灌注2和14 d时肾组织APPL1及其mRNA表达上调(P<0.05)。
结论APPL1表达上调可能参与了肾缺血再灌注损伤小鼠肾纤维化的过程。