【摘 要】
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目的 探讨影响噬菌体生物扩增法检出结核分枝杆菌敏感性的关键环节,即最佳感染时间.方法 观察噬菌体生物扩增法中噬菌体D29分别感染结核分枝杆菌0、0.5、1、1.5、2、3、4、5
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院呼吸科,中国药品生物制品检定所菌苗室
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目的 探讨影响噬菌体生物扩增法检出结核分枝杆菌敏感性的关键环节,即最佳感染时间.方法 观察噬菌体生物扩增法中噬菌体D29分别感染结核分枝杆菌0、0.5、1、1.5、2、3、4、5、6和8 h对噬菌斑数量的影响.并且在电镜下直接观察噬菌体D29与结核分枝杆菌和耻垢分枝杆菌中共同孵育0、15、30、60、90、120、180、240、360 min时,噬菌体的吸附、感染和增殖情况.综合上述两种方法 结果 确定噬菌体生物扩增法环节中的最佳感染时间.结果 噬菌体感染结核分枝杆菌3～4 h时,噬菌斑形成数量达到高峰[(321±2.65)PFU],4 h后噬菌斑开始出现下降,5 h时噬菌斑数为(300±5.62)PFU.在电镜下直接观察到噬菌体D29与耻垢分枝杆菌接触15 min后,即开始吸附耻垢分枝杆菌,3 h后完成子代噬菌体的合成.噬菌体D29与结核分枝杆菌接触3～4 h时吸附感染部分结核分枝杆菌,6 h后完成子代噬菌体合成.结论 采用噬菌体生物扩增法检测标本中结核分枝杆菌需要多个环节,并且可以同时检测大量标本,为提高检测的敏感性以3 h作为感染时间最为恰当.
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