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目的
探讨表皮生长因子促进胶质瘤U251细胞的增殖和侵袭是否涉及电压-门控钠离子通道(VGSCs)亚型nNav1.5的表达。
方法设计合成nNav1.5特异性siRNA,脂质体转染U251细胞,用Western blot法检测转染效率;表皮生长因子(100 ng/L)处理空白组和转染组细胞后,用Real-time PCR和Western blot法分别检测nNav1.5 mRNA和蛋白在各组细胞中的表达水平,并用改良MTT法和Matrigel侵袭实验检测各组细胞增殖及侵袭能力的变化。
结果siRNA成功转染U251细胞;100 ng/L表皮生长因子显著上调U251细胞nNav1.5 mRNA和蛋白的表达的水平(P<0.05),并增加肿瘤细胞的增殖和侵袭(P<0.05);在siRNA沉默U251细胞nNav1.5表达后,100 ng/L表皮生长因子上调U251细胞nNav1.5 mRNA和蛋白的表达水平能力下降(P<0.05),而且促进肿瘤细胞增殖和侵袭的能力明显下降(P<0.05)。
结论表皮生长因子可通过上调nNav1.5的表达促进胶质瘤U251细胞增殖和侵袭能力。