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目的
应用聚合酶链反应-高分辨率熔解曲线分析(polymease chain reaction-high-resolution melting analysis，PCR-HRMA)技术筛查成骨不全症(osteogenesis imperfecta，OI)患者 COL1A1/COL1A2基因的突变，并探讨突变位点与疾病的关系。
方法采集家系成员(患儿、患儿父母)以及50名正常对照的血液样本，应用PCR-HRMA技术筛查患儿家系及正常对照者的 COL1A1/ COL1A2基因突变，并用基因测序验证。应用蛋白预测软件PolyPhen、SIFT及Align GVGD对两个杂合突变进行预测。
结果该患儿及其父母 COL1A1基因第45外显子区域的PCR-HRMA结果显示异常，标准熔解曲线和差异熔解曲线与正常对照比较均存在明显差异。测序结果显示，患儿 COL1A1基因第45外显子区域发生两个杂合突变(c.3235G>A、c.3247G>A)，临床诊断为Ⅳ型OI。c.3235G>A来源于患有OI的父亲，使α螺旋结构域1079位氨基酸由甘氨酸(Gly)突变为丝氨酸(Ser)。c.3247G>A来源于表型正常的母亲，使1083位氨基酸由丙氨酸(Ala)突变为苏氨酸(Thr)。50名正常对照均未发现这两种突变。3种蛋白预测软件PolyPhen、SIFT及Align GVGD均预测c.3235G>A突变可能影响蛋白的功能。而c.3247G>A突变，PolyPhen软件预测其可能为良性。
结论COL1A1基因第45外显子上同时存在c.3235G>A、c.3247G>A突变的病例在人类胶原突变数据库中未见报道。COL1A1基因c.3235G>A突变可能是导致该患儿成骨不全的主要原因。