禽呼肠病毒σC基因的表达及ELISA抗体检测方法的建立

来源 :动物医学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jinnanwc2

【摘要】

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将RT-PCR扩增得到的禽呼肠病毒（ARV）S1133毒株的σC基因克隆至pMD-18T-Simple载体，经酶切及测序鉴定，证明该基因片段为ARVdC基因。将该基因亚克隆至pET32a（＋）成功构建了表达载体pET3

【作者】

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董嘉文孙敏华李林林胡奇林

【机构】

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广东省农业科学院兽医研究所

【出处】

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动物医学进展

【发表日期】

：

2012年8期

【关键词】

：

禽呼肠病毒 σC基因克隆与表达酶联免疫吸附试验 Avian reovirus σ C gene clone and expression enzyme-

【基金项目】

：

基金项目：广东省重大科技项目（20098020201008）,广东省产学研结合项目（2010A09020029-10）

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将RT-PCR扩增得到的禽呼肠病毒（ARV）S1133毒株的σC基因克隆至pMD-18T-Simple载体，经酶切及测序鉴定，证明该基因片段为ARVdC基因。将该基因亚克隆至pET32a（＋）成功构建了表达载体pET32a-σC。该重组质粒在大肠埃希菌BL21中经1．0mmol／LIPTG诱导5h得到最佳表达。pET32a-σC蛋白的分子质量为55ku，Westernblot分析表明，该重组蛋白能与ARV阳性血清发生特异性反应，表明其具有良好的反应原性。将纯化好的ARVσC蛋白作为包被抗原，确定了该方法的

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