【摘 要】
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目的:研制用于基因转染的细胞培养板.方法:用0.2%的明胶稀释LPEI, BPEI, Superfect,Lipofectamine 2000等转染试剂并将它们固定在96孔细胞培养板上.以绿色荧光蛋白(GFP)基因
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目的:研制用于基因转染的细胞培养板.方法:用0.2%的明胶稀释LPEI, BPEI, Superfect,Lipofectamine 2000等转染试剂并将它们固定在96孔细胞培养板上.以绿色荧光蛋白(GFP)基因和荧光素酶基因(Luciferase)为报告基因检测培养板的转染效率,用MTT法检测转染24 h后的细胞毒性,将LPEI包被的培养板放置在37℃环境下进行稳定性研究.结果:所有试剂包被的培养板均有一定的基因转染效率,聚合物类试剂的效率高于脂质体类的Lipofectamine 2000.其中,LPEI包被的培养板的转染效率最高、细胞毒性最低.当LPEI的包被量为3.2 μg/孔时,293细胞在转染24 h后的荧光素酶活性达3.0×108 RLU/mg,细胞存活率为85%左右.LPEI包被的培养板在37℃保温14 d后基因转染效率无明显变化.结论:LPEI包被的转染平板具有转染效率高、细胞毒性低、稳定性好的优点.该平板具有操作简便、节省时间的优点,可用于进行大规模的基因转染研究.
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