同型半胱氨酸对大鼠血管内皮细胞MMP-2表达的影响和黄酒、红葡萄酒的逆转效应及其机制

来源 :西安交通大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:wdhpll
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目的观察黄酒能否抑制同型半胱氨酸(Hcy)诱导的大鼠血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)表达及探讨其可能机制。方法大鼠原代主动脉VECs经分离培养及纯化鉴定后,取第3~4代细胞用于实验。将Hcy(0、50、100、500、1 000μmol/L)与VECs共同孵育48h及100μmol/L Hcy与VECs共同培养24、48、72h,分别用荧光定量PCR(FQ-PCR)和免疫印迹法检测Hcy对VECs中MMP-2mRNA和蛋白表达的影响,确定Hcy最佳的刺激浓度和时间。每种酒(10、12、14、16、18、20mL/L)与100μmol/L Hcy共同孵育VECs 48h,MTT法检测酒类对细胞活性的影响,确定最佳干预浓度后处理分为正常组、Hcy组、Hcy+黄酒组、Hcy+红葡萄酒组、Hcy+酒精组5组。培养48h后收集样品,FQ-PCR检测VECs中MMP-2mRNA水平,免疫印迹法测定VECs中MMP-2的表达量。结果在50~1 000μmol/L浓度范围内与对照组相比Hcy能明显地增强MMP-2 mRNA和蛋白表达(P<0.05或P<0.01),至500μmol/L时开始达到最高。Hcy(100μmol/L)刺激24、48、72h后MMP-2mRNA和蛋白表达较对照组有明显的增强(均P<0.01),48h后开始达到最大值。实验组与Hcy组相比,黄酒组和红酒组MMP-2mRNA和蛋白表达均明显下降,差异有统计学意义(均P<0.01)。酒精组MMP-2mRNA和蛋白表达下降,差异均无统计学意义(P>0.05)。与酒精组相比,黄酒组和红酒组VECs中MMP-2mRNA和蛋白表达均明显下降,差异有统计学意义(均P<0.01),黄酒组和红酒组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Hcy能增强VECs中MMP-2mRNA和蛋白的表达,这可能在动脉粥样硬化的发病机制中发挥重要作用。黄酒和红葡萄酒能抑制Hcy对MMP-2mRNA和蛋白表达的增强,这可能是它们抗动脉粥样硬化和心血管保护作用的机制之一。
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