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塞尼卡谷病毒（Seneca valley virus，SVV）可感染猪，引起类似口蹄疫病毒感染造成的水疱性病变，新生仔猪病死率达30%~70%。本研究利用重组酶聚合酶扩增技术（RPA），针对SVV3D基因设计了引物和探针，并进行筛选、反应条件优化以及敏感性、特异性和重复性试验，建立了实时荧光RPA方法。结果显示，本方法在40℃、10min内检测的最低浓度为28拷贝/μL；与口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒无交叉反应；通过3次重复试验检测2.8×1