【摘 要】
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利用巴斯德毕赤酵母（Pichiapastoris）重组表达人角质细胞生长因子（humankeratinocytegrowthfactor，hKGF），为实现规模化生产重组hKGF奠定基础。方法：根据已报道的hKGF成熟肽序列，人工
【机 构】
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陕西省动物研究所,暨南大学广东省生物工程药物重点实验室,暨南大学基因工程药物国家工程研究中心
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利用巴斯德毕赤酵母（Pichiapastoris）重组表达人角质细胞生长因子（humankeratinocytegrowthfactor，hKGF），为实现规模化生产重组hKGF奠定基础。方法：根据已报道的hKGF成熟肽序列，人工合成由毕赤酵母偏好密码子组成的编码hKGF的DNA片段后连接到分泌型表达质粒pPICZotA中，获得重组表达质粒并转化毕赤酵母X-33中进行表达。优化发酵条件，并利用5L生物反应器进行中试发酵。发酵上清通过超滤及层析方法分离纯化重组蛋白，并利用MMT法检测其对恒河猴肺上皮细胞的促
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