【摘 要】
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目的建立多种呼吸道病原体的多重实时荧光定量聚合酶链反应(multiplex real-time-PCR,MRTPCR)检测方法。方法根据生物信息学分析结果选定各种呼吸道病原体的靶序列,建立MRT-P
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目的建立多种呼吸道病原体的多重实时荧光定量聚合酶链反应(multiplex real-time-PCR,MRTPCR)检测方法。方法根据生物信息学分析结果选定各种呼吸道病原体的靶序列,建立MRT-PCR检测体系。构建质粒标准品,检测建立体系的敏感度、特异度和重复性,并运用MRT-PCR和单荧光定量PCR检测临床样本进行对比分析。结果成功建立了多种呼吸道病原体的MRT-PCR检测体系;该方法特异度较好,最低检测限为10copies/μL,重复性良好,变异系数为0.99%~2.50%,530例临床样本中,MRT-PCR检测的阳性率为59.2%(314/530),单荧光定量PCR检测的阳性率为61.1%(324/530),阳性检出率差异不大。结论建立快速、敏感、特异、稳定的MRT-PCR检测体系,具有良好的临床应用前景。
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