【摘 要】
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目的：克隆粘质沙雷氏菌脂肪酶基因（lipA）使其在大肠杆菌BL21（DE3）中实现高效表达,并对重组酶进行酶学性质研究。方法：以产脂肪酶粘质沙雷氏菌总DNA为模板,PCR扩增脂肪酶基因lipA,构
【机 构】
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广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心,广西大学生命科学与技术学院
【基金项目】
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广西科技攻关项目(“生产生物柴油共性键技术的研发—生物柴油生产用共性脂肪酶的技术和工艺研究”,桂科攻08950034-1);广西科学院创新基金(“基于广西优势资源甘蔗及木质纤维、木薯和油料作物等的生物质能源关键共性技术研究”,桂科院研0701);广西科学院基金项目(“粘质沙雷氏菌脂肪酶基因在大肠杆菌中的高效表达及分子改性”,09YJ17SW04)资助
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目的：克隆粘质沙雷氏菌脂肪酶基因（lipA）使其在大肠杆菌BL21（DE3）中实现高效表达,并对重组酶进行酶学性质研究。方法：以产脂肪酶粘质沙雷氏菌总DNA为模板,PCR扩增脂肪酶基因lipA,构建重组表达载体pET-lipA,并将其导入大肠杆菌进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和酶学性质的测定。结果：经过优化培养条件,脂肪酶活力最高能达到104U/mL。重组脂肪酶的最适反应温度为40～45℃,最适pH为7.0～7.5,在50℃保温1h下仍能保持80%的酶活力,Ca2＋、Sr2＋、Mn2＋和Mg
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