【摘 要】
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目的观察沉默细胞周期蛋白依赖性激酶5(Cdk5)对星形胶质细胞活化增殖和细胞周期的影响。方法培养及鉴定SD大鼠星形胶质细胞,设计合成针对星形胶质细胞Cdk5的小干扰RNA(siRNA)
【机 构】
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广东省东莞市中山大学附属东华医院神经内科; 华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科;
【基金项目】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院科研基金资助项目(2201101919);华中科技大学同济医学院研究型临床医师资助计划(5001540023)
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目的观察沉默细胞周期蛋白依赖性激酶5(Cdk5)对星形胶质细胞活化增殖和细胞周期的影响。方法培养及鉴定SD大鼠星形胶质细胞,设计合成针对星形胶质细胞Cdk5的小干扰RNA(siRNA),将Cdk5 siRNA转染入星形胶质细胞,通过Real-time PCR和Western blot检测沉默效率;分为对照组及Cdk5 siRNA干预组,在不同时间点(3、6、12及24 h)采用Edu染色及流式细胞术检测细胞增殖及细胞周期情况。结果成功利用Cdk5 siRNA沉默星形胶质细胞Cdk5;Edu染色显示Cdk5 siRNA干预组干预3、6、12 h Edu染色阳性率较对照组显著降低(P<0.01);流式细胞术显示Cdk5 siRNA干预组干预3、6、12 h处于S期的星形胶质细胞比例较对照组显著降低(P<0.05)。结论沉默Cdk5可抑制星形胶质细胞的增殖及细胞周期进展,提示Cdk5在星形胶质细胞增殖过程中起到重要作用。
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