【摘 要】
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应用Gap-Repair新技术,以pBR322为载体,在λ噬菌体Red重组酶的作用下,通过同源重组直接从大肠杆菌DY330染色体上亚克隆了长度为6.7 kb的包含Red重组酶基因的λ噬菌体左向操纵
【机 构】
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军事医学科学院生物工程研究所,厦门大学生命科学院
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应用Gap-Repair新技术,以pBR322为载体,在λ噬菌体Red重组酶的作用下,通过同源重组直接从大肠杆菌DY330染色体上亚克隆了长度为6.7 kb的包含Red重组酶基因的λ噬菌体左向操纵子基因序列.建立了一种能够随意在不同细菌宿主中转移的基于pBR322-Red的重组工程系统.为了验证pBR322-Red的生物功能,以大肠杆菌染色体上的galk基因为靶标,用Red介导的单链DNA重组技术敲入T→G单碱基突变,使galk基因内编码第145位氨基酸的密码子由TAT转变成TAG,产生了一个琥珀突变.确
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