高致病性PRRSVJL-04／12株核衣壳蛋白的表达与抗原性分析

来源 :动物医学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gaoyeye

【摘要】

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为获得高浓度、高质量的有效原核表达蛋白作为ELISA诊断抗原，通过RT—PCR法扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）JL-04／12株的核衣壳蛋白（N蛋白）基因并克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中

【作者】

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王凤雪刘莹杨勇朱洪伟孙娜刘杏程世鹏温永俊

【机构】

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中国农业科学院特产研究所/特种经济动物分子生物学重点实验室

【出处】

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动物医学进展

【发表日期】

：

2015年10期

【关键词】

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猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白原核表达纯化 Porcine reproductive and respiratory syndrome virus nu

【基金项目】

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吉林省科技发展计划项目（20121823）,国家“十二五”高技术研究发展计划项目（2011AA10A213）

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为获得高浓度、高质量的有效原核表达蛋白作为ELISA诊断抗原，通过RT—PCR法扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）JL-04／12株的核衣壳蛋白（N蛋白）基因并克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中，转入到大肠埃希菌BL-21感受态细胞，经IPTG诱导表达，通过温度和IPTG浓度的优化，进行重组蛋白的高效表达，经SDS-PAGE和Westernblot对表达产物的特性进行分析，利用GsT柱纯化表达蛋白，并免疫小鼠，ELISA检测其刺激产生抗体的能力一抗原的免疫原性。结果表明，0．1mmol／L的IP

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