泛素连接酶E4B介导POLDIP2的泛素化及其降解

来源 :石河子大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：syw2565

【摘要】

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目的旨在细胞外和HEK293细胞中鉴定聚合酶δ相互作用蛋白2(POLDIP2)是否为泛素连接酶E4B的底物,并探究E4B能否介导POLDIP2经由26S蛋白酶体降解。方法利用BL21表达并纯化POLDI

【作者】

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李莎莎赵博

【机构】

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上海交通大学药学院

【出处】

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石河子大学学报:自然科学版

【发表日期】

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2021年4期

【关键词】

：

泛素连接酶 E4B 聚合酶相互作用蛋白2 泛素化降解

【基金项目】

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国家自然科学基金项目(31971187,31770921),上海市科委基础研究领域项目(20JC1411200)。

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目的旨在细胞外和HEK293细胞中鉴定聚合酶δ相互作用蛋白2(POLDIP2)是否为泛素连接酶E4B的底物,并探究E4B能否介导POLDIP2经由26S蛋白酶体降解。方法利用BL21表达并纯化POLDIP2蛋白,设置体外E1-E2-E3泛素传递反应,通过western blot检测POLDIP2的泛素化;同时,构建pcDNA-Flag-POLDIP2重组质粒并转染进HEK293细胞、E4B敲减稳转株(shE4B)、E4B过表达细胞株(E4B OE)中,通过免疫共沉淀检测E4B表达量的变化是否影响POLDI

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