【摘 要】
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目的在原核细胞中表达SjGST和Sj14-3-3的融合蛋白. 方法 RT-PCR法从日本血吸虫成虫总RNA中扩增出Sj14-3-3基因,亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,并转化E. coli BL21,IPTG诱导
【机 构】
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蚌埠医学院免疫学教研室,安徽医科大学病原生物学教研室
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目的在原核细胞中表达SjGST和Sj14-3-3的融合蛋白. 方法 RT-PCR法从日本血吸虫成虫总RNA中扩增出Sj14-3-3基因,亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,并转化E. coli BL21,IPTG诱导表达,Western-blot鉴定表达产物. 结果扩增产物约为765 bp,重组质粒经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后可得到一与PCR产物大小相同的DNA片段,经IPTG诱导后在55 ku附近出现一新增蛋白条带,Western-blot结果显示,表达产物可被兔抗鼠14-3-3ε多克隆抗体识别.
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