石杉科植物RAPD反应体系的优化

来源 :三明学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：catscafe

【摘要】

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以石杉科新鲜植物为材料，应用改良的CTAB法提取其基因组DNA，通过单因子实验优化了RAPD的反应体系。在25uL反应体系中，Mg^2＋2．0mmol／L，dNTPs 0．3mmol／L，模板DNA3ng／uL，随机引物0．2umol／L，TaqD

【作者】

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宋育红张新文叶祖禄龚培灶

【机构】

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三明学院应用生物技术研究所,三明学院化学与生物工程系

【出处】

：

三明学院学报

【发表日期】

：

2009年2期

【关键词】

：

石杉科 DNA提取 RAPD 体系优化 Huperziaceae DNA extraction RAPD） system optimization

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以石杉科新鲜植物为材料，应用改良的CTAB法提取其基因组DNA，通过单因子实验优化了RAPD的反应体系。在25uL反应体系中，Mg^2＋2．0mmol／L，dNTPs 0．3mmol／L，模板DNA3ng／uL，随机引物0．2umol／L，TaqDNA聚合酶1．25U。PCR循环程序为：94℃预变性5min；然后94℃变性1min，39℃退火1min，72℃延伸1．5min，36个循环；最后72℃延伸7min。4℃保存。结果表明该体系具有良好的稳定性和重复性，可应用于石杉科植物系统分类，种的鉴定和遗传多样

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