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目的
观察Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路核心蛋白β-连环蛋白及其靶基因在大鼠小体积肝移植物再生早期的表达及意义。
方法建立30%、50%体积供肝大鼠肝移植模型。实验分为小肝组、半肝组和假手术组,每组分别于供肝冷保存后及移植后5min、2h、6h、12h及24h取肝组织样本进行相关检测,取术后3d存活受鼠的移植肝称重,计算肝再生率。
结果术后3d,半肝组的肝再生率为145%,小肝组为108%,小肝组明显低于半肝组(P<0.05)。两组在冷保存后β-连环蛋白表达均降低,但术后5min时半肝组β-连环蛋白的表达迅速升高,超过假手术组,并持续到术后12h,而术后5min时小肝组β-连环蛋白呈现低表达,仅在术后2h和6h时表达增强,且弱于半肝组;术后5min时半肝组active-β-连环蛋白的表达升高,持续到术后12h,小肝组在术后2h时active-β-连环蛋白的表达增强,但随后时段呈低表达状态;经免疫组织化学染色观察,β-连环蛋白在假手术肝细胞膜表达,半肝组术后12h内大量肝细胞呈现细胞核表达,而小肝组的细胞核表达明显低于半肝组;Wnt/β-连环蛋白信号通路靶基因CyclinD1和C-Myc在半肝组表达增强,而在小肝组表达无明显增强。
结论Wnt/β-连环蛋白信号通路在小体积移植肝再生早期没有激活,其下游基因CyclinD1和C-Myc的表达降低,可能是小体积肝移植物再生障碍的原因之一。