【摘 要】
：
目的建立数字PCR(dPCR)检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因T790M突变平台，并评估其基本性能和临床价值。方法方法学建立。收集2014年1月至2015年10月于复旦大学附属中山医院就诊的10例经EGFR-TKI治疗后发生耐药的NSCLC患者。设计EGFR基因T790M突变及野生型的引物及特异性探针，建立dPCR检测EGFR基因T790M突变平台，根据自配不同浓
【机 构】
：
200032 上海，复旦大学附属中山医院检验科,200032 上海，复旦大学附属中山医院检验科,200032 上海，复旦大学附属中山医院检验科,200032 上海，复旦大学附属中山医院检验科,2000
论文部分内容阅读
目的建立数字PCR(dPCR)检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因T790M突变平台，并评估其基本性能和临床价值。
方法方法学建立。收集2014年1月至2015年10月于复旦大学附属中山医院就诊的10例经EGFR-TKI治疗后发生耐药的NSCLC患者。设计EGFR基因T790M突变及野生型的引物及特异性探针，建立dPCR检测EGFR基因T790M突变平台，根据自配不同浓度标准品质粒验证该检测平台空白限、灵敏度和线性以建立最适报告和复检流程。采用dPCR和扩增受阻突变系统(ARMS)检测患者肺癌组织和血浆标本，卡方检验比较两种方法检测不同标本类型的EGFR基因T790M突变一致性，Pearson相关分析dPCR检测肺癌组织和血浆突变分子丰度的相关性。
结果dPCR检测平台空白限为10拷贝，功能灵敏度为0.01%，且在0.01%～100%范围内线性良好(Y＝1.226X－3.984，R2＝0.999)。dPCR和ARMS检测肺癌组织EGFR基因T790M突变一致性较高(kappa＝0.80)，而dPCR检测血浆突变阳性率高于ARMS(50% vs 20%，P<0.05)Pearson相关分析发现dPCR检测肺癌组织和血浆突变分子丰度高度相关(R＝0.923，P<0.05)。
结论建立了高灵敏、绝对定量的dPCR检测EGFR基因T790M突变平台，其联合血浆ctDNA能真正实现"液体活检"，对指导耐药后患者个体化治疗有重要价值。(中华检验医学杂志，2016, 39：170-175)
其他文献
目的 分析在生物样本库中,冻存温度、冻存时间及反复冻融效应对血清常规生化指标的影响,以探讨血清常规生化指标在生物样本库中的稳定性.方法 以2014年7月江苏省泰兴市人民医
中国家族性阿尔茨海默病(FAD)注册登记网(Chinese familial Alzheimers disease network,CFAN)是覆盖全国的FAD注册登记网络,由贾建平教授于2014年牵头发起创办,2016年优化改
肝功能异常的高脂血症,临床治疗时不宜用西药脱脂降脂.我们于2003年12月至2005年2月,用血脂康胶囊治疗肝功能异常的高脂血症46例,现将结果分析如下。
我一直从事口腔颌面外科工作,主要做口腔颌面部肿瘤治疗.1973年10月的一个上午,一位由母亲陪同的21岁女患者被护士带到我诊椅旁.母亲先开口:“大夫,救救这孩子吧!你看看,否则
健康中国战略全面实施,医疗改革不断深化,我国医药生态格局和行业运行规则正在发生剧变,以临床价值、科学价值为核心的科技创新驱动,正成为中药产业发展的核心推动力.为推进
在2017年复旦大学医院管理研究所发布的《2016年度中国医院专科声誉排行榜》中,哈尔滨医科大学附属第二医院心血管内科(哈医大二院心内科)名列第八,实现了连续3年排名前十基
糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一组以慢性血糖水平增高为特征的代谢疾病群.高血糖是由于胰岛素分泌缺陷和(或)胰岛素作用缺陷而引起.除碳水化合物,尚有蛋白质、脂肪代谢异常.以往的研究集中在糖代谢和脂代谢异常在糖尿病并发症中的作用,对蛋白质代谢异常在糖尿病并发症中的作用研究非常匮乏.目前,学者们对高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)血症致大血管动脉粥样硬化的观点已达成
随着人们生活水平和医疗条件的提高,越来越多的产妇渴望拥有一个无痛的分娩过程,所以选择安全、有效、实用的分娩镇痛方式,已成为产科医生临床研究的重要课题.本文就吸入氧化亚氮在分娩镇痛中的应用作一综述。
双联抗血小板治疗(DAPT)和经皮冠状动脉介入治疗(PCI)均被证实为治疗急性冠状动脉综合征(ACS)的有效临床手段.现阶段,指南建议植入药物洗脱支架(DES)后DAPT的使用时间为12个
自1998年至2005年,作者采用浆肌层下切除黏膜组织治疗阑尾粘连包块25例,取得了良好效果,现介绍如下。