【摘 要】
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为H9与H6亚型禽流感病毒(AIV)的监测及其防控提供技术支撑,依据Genbank中H9和H6亚型AIV的HA基因及所有亚型AIV M基因的保守序列,分别设计3对特异性引物,优化退火温度和引物浓
【机 构】
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广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室
【基金项目】
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广西科技重大专项“畜禽重大病害生态综合防控技术创新示范”(桂科AA17204057),广西科技基地和人才专项“广西鸡病毒性新发传染病综合防控技术的研究与应用”(桂科AD17195083),广西“八桂学者”专项(2019-79),国家“万人计划”领军人才专项(2016-37-88)
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为H9与H6亚型禽流感病毒(AIV)的监测及其防控提供技术支撑,依据Genbank中H9和H6亚型AIV的HA基因及所有亚型AIV M基因的保守序列,分别设计3对特异性引物,优化退火温度和引物浓度及其配比等条件,建立并优化可同时鉴别检测H9和H6亚型AIV的三重RT-PCR检测方法,并对所建方法进行特异性、敏感性及临床样品检测验证。结果表明:三重RT-PCR反应的最佳体系为2×PCR Mix 12.5μL,H9与H6亚型AIV cDNA共2μL为模板,特异性引物M-F和M-R(20pmol/μL
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