【摘 要】
：
目的 构建大容量噬菌体单链抗体库 ,从中筛选人源单链抗体 (ScFv)。方法 从正常成人外周血和新生儿脐血分离淋巴细胞 ,用RT PCR扩增轻链可变区基因 (VL)和重链可变区基因(V
【机 构】
：
解放军海军总医院,解放军海军总医院,解放军海军总医院,解放军海军总医院,解放军海军总医院 100037北京,100037北京,100037北京,100037北京,100037北京
论文部分内容阅读
目的 构建大容量噬菌体单链抗体库 ,从中筛选人源单链抗体 (ScFv)。方法 从正常成人外周血和新生儿脐血分离淋巴细胞 ,用RT PCR扩增轻链可变区基因 (VL)和重链可变区基因(VH) ,通过重叠PCR法将VH 和VL 拼接形成ScFv基因 ,并克隆入噬菌体表达载体PDF ,得到ScFv初级噬菌体抗体库。以高MOI超感染cre+ 菌株BS136 5 ,通过loxp cre定位重组系统 ,介导轻重链的组合配对 ,得到大容量抗体库 ,用多种抗原对抗体库进行生物淘筛 ,鉴定抗体库的性能。结果 获得了 6×10 10 的大容量单链噬菌体抗体库。分别用卵清蛋白、胃蛋白酶、铁蛋白、人角蛋白、人TNF α、地高辛等6种抗原进行筛选 ,均得到多样性的特异性噬菌体抗体。结论 经loxp cre定位重组系统在单细胞内重组成功地构建了大容量单链噬菌体抗体库 ,初步尝试对 6种抗原进行筛选均获成功 ,提示该抗体库可用于制备具有应用前景的人源抗体
其他文献
大量维数约简方法表明保持数据间稀疏特性的同时, 确保几何结构的保持能更有效提取出具有鉴别性的特征, 为此本文提出一种联合局部几何近邻结构和局部稀疏流形的维数约简方法
目的建立同时测定甘草浸膏中甘草酸和甘草苷含量的反相高效液相色谱(RP-HPLC)法。方法色谱柱为ZorbaSB-C18柱(150mm×4.6mm,5μm),以乙腈-1%磷酸为流动相,流速为1.0mL/min,检
目的：通过总结我院护理不良事件发生的常见原因,探讨有效地管理方法,避免或减少护理不良事件的发生。方法：采用设计好的护理不良事件上报表,由病区护士长对本病区发生的护理不
微信开启了真正的自媒体时代,但其带来泛滥的著作权侵权纠纷并没有得到合理的规制,本文以著作权投诉比例最大的微信公众号为论述对象,指出作为网络服务提供商的微信平台在利
<正>随着京津冀一体化格局逐步明朗,固安站在了产业融合的前沿,"天时地利人和"的固安,或将成为新型城镇化下幸福城市的样本以北京天安门为中心一路向南50公里,都市喧嚣渐渐退
财政部、国家税务总局、商务部、科技部和国家发改委联合下发的《关于技术先进型服务企业有关企业所得税政策问题的通知》(财税[2010]65号，以下简称财税[2010]65号文)是继上述
随着社会经济的快速发展,人民的生活水平不断提高,同时也导致环境问题越发严重,生态失衡。文章通过对农村生态环境保护中存在的问题进行分析,提出了相应的治理对策,以期促进
日前,合景泰富集团委托委任仲量联行为广州超甲级写字楼国际金融广场(IFP)独家租赁代理及物业管理管理服务,项目将于8月份推出市场。为了保证国际金融广场的最佳租户组合,并
<正>"2014婚恋幸福感"调查结果显示,在幸福婚姻的九大要素中,受访者把门当户对排在了最后一位,只有8.3%的人认为门当户对是影响婚姻幸福的重要因素。那么更重要的标准是什么?
长篇小说《荆棘鸟》是澳大利亚作家考琳·麦卡洛的代表作。在这位女性作家的笔下,克利里家三代女性呈现出不同的样态,她们或是觉醒,或是妥协,亦或是完成自我救赎。她们与男性