细胞毒素Gelonin的亚克隆、表达与纯化

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将分别含有细胞毒素gelonin基因片断的重组子pUC-gell和pUC-gelⅡ,按照预先设计的酶切位点,通过亚克隆得到含有gelonin全基因的重组子pUC-gel.然后将pUC-gel与pET28a同时用NdeI/EcoRI双酶切,相关片段构建成表达重组子pET-gel,并进行DNA序列测定.工程菌E.coli B121/pET-gel表达产物经两步SP-Seph-rose柱层析,可得电泳纯的重组gelonin,分子质量为28000 u.无细胞体系蛋白质合成实验表明,其IC50(使蛋白质合成抑制50
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