优质HMW谷蛋白亚基转基因小麦的获得及其遗传稳定性和品质性状分析

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  摘要 利用编码除草剂PPT抗性的bar基因作为选择标记,构建了含有优质HMW谷蛋白亚基1Dx5和IDylO基因的植物表达载体pBPC30,用基因枪导入京花l号、京411号和京冬6号等受体品种的幼胚和幼穗,获得了一批转基因小麦植株(T,,)及其后代株系(T1,一T5).PCR,点杂交和Southern杂交鉴定表明,外源基因已整合到转化植株T。的基因组,并稳定表达.转基因植株丁1代能抗20—80 mg/L的PPT,其中1株抗性超过150mg/L.经SDS—PAGE分析表明,外源1Dx5和1DvlO基因在T2代不同株系中获得了表达.转基因系TG3—74缺失了亚基8,但亚基2,5,10和12都表达,同时出现了一个新的亚基位于亚基7与原有亚基8之间(暂记为8).品质分析结果表明,有5个株系的Zeleny沉淀值为44.2—49.0mL,与对照CNN(48.0mL)相当,分别比京花1号(26.9mL)和京冬6号(30.7mL)提高了59.6%—64.3%.Ti代株系的粉质曲线稳定时间比受体品种(3—7 min)大幅增长,转基因株系TG5—23b的稳定时间为16 min,TGl—28d,TG3—76b,TG5—98和TG5—99的面团稳定时间高达30min以上.
  关键词 小麦 HMW谷蛋白亚基 转基因 品质 遗传稳定’陛
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