BTBD10基因的真核表达载体构建和亚细胞定位

来源 :中国分子心脏病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kinganguo

【摘要】

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目的构建BTBD10重组真核表达载体，观察BTBD10在HEK293细胞中的定位。方法利用PCR方法扩增BTBD10全长，经HindIII和BamHI酶切后连接入pGFP-C3真核表达载体，构建pGFP—C3-BTBD10重

【作者】

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刘瑜王宣春陈凤玲李春霖胡仁明

【机构】

：

中国人民解放军总医院老年内分泌科,复旦大学附属华山医院内分泌科、复旦大学内分泌糖尿病研究所

【出处】

：

中国分子心脏病学杂志

【发表日期】

：

2009年1期

【关键词】

：

BTBD10 真核表达转染 BTBD10 Prokaryotic expression Transfection

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目的构建BTBD10重组真核表达载体，观察BTBD10在HEK293细胞中的定位。方法利用PCR方法扩增BTBD10全长，经HindIII和BamHI酶切后连接入pGFP-C3真核表达载体，构建pGFP—C3-BTBD10重组表达质粒，转染HEK293细胞，利用激光共聚焦显微镜观察BTBD10在细胞中的定位。结果经双酶切和核酸序列分析证实重组质粒包含有正确编码的BTBD10读码框。激光共聚焦显微镜观察到空质粒pGFP—C3转染后，整个细胞内弥散绿色荧光，而转染pGFP-C3-BTBD10重组载体后，可见绿

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