原核表达小鼠可溶性Fas抑制活化诱导的脾细胞凋亡研究

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目的观察原核表达、制备小鼠可溶性Fas用于抑制活化诱导的脾细胞凋亡的效果。方法通过RT-PCR从小鼠胸腺中扩增可溶性Fas基因,克隆至原核表达载体pET-28a(+),构建pET-sFas重组质粒,转化大肠杆菌BL21,经异丙基伊胁硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后获得高表达的可溶性Fas。经镍柱亲和层析纯化后用于抑制刀豆素A(ConA)刺激下的脾细胞活化诱导凋亡。结果基因测序、Western-blot鉴定证实为可溶性Fas的原核表达蛋白,该蛋白能抑制小鼠脾细胞在ConA刺激下发生的凋亡[对照组凋亡率(70.
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