【摘 要】
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趋化因子是一类具有化学趋化功能的小分子分泌性蛋白, 能够引导白细胞到损伤或者感染的部位, 参与免疫调节和病理反应。为丰富鲆鲽鱼类趋化因子的相关基础研究, 本研究克隆了
【机 构】
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中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部农村海洋渔业可持续发展重点实验室; 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室; 上海海洋大学水产与生命学院;
【基金项目】
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山东省自然科学基金重点项目(ZR2016QZ003);国家自然科学基金青年基金项目(31802332);山东省泰山学者攀登计划专项资助;中国水产科学研究院黄海水产研究所基本科研业务费(20603022018026)
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趋化因子是一类具有化学趋化功能的小分子分泌性蛋白, 能够引导白细胞到损伤或者感染的部位, 参与免疫调节和病理反应。为丰富鲆鲽鱼类趋化因子的相关基础研究, 本研究克隆了牙鲆(Paralichthys olivaceus)趋化因子基因CXCL9, 其全长为910 bp, 开放阅读框为408 bp, 编码135个氨基酸。该基因具有趋化因子超家族的典型特征, 在35、37、60和77个氨基酸位置具有4个保守的半胱氨酸残基, 形成两个二硫键。氨基酸序列分析表明, 该基因与大菱鲆(Scophthalmus maximus)、半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)的CXCL9基因具有较高的同源性, 分别为78.5%和71.0%。实时荧光定量PCR结果显示, CXCL9在正常牙鲆肝脏和脾脏中的表达量非常高, 在皮肤和鳃等组织中表达量次之, 说明CXCL9特异性地在免疫相关组织中表达。经迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)感染后, 牙鲆肝脏中CXCL9 mRNA表达量在感染后6 h即出现高峰值, 而头肾和脾脏中的高峰值出现较晚。经鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染后6 h, 牙鲆肝脏中CXCL9 mRNA的表达量升高近8倍, 头肾中的表达高峰值出现在感染后24 h, 而脾脏中CXCL9 mRNA的表达量在感染后6 h迅速升高10倍, 逐渐降低后48 h又出现高峰, 为正常水平的20倍。上述研究结果说明CXCL9基因在病原菌感染过程中有快速响应, 可能参与了免疫防御过程, 将有可能发展为一种牙鲆细菌性疾病的生物标记。本研究为牙鲆趋化因子超家族免疫机制的深入研究奠定了基础。
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