牙鲆趋化因子基因CXCL9的克隆、鉴定与表达分析

来源 :中国水产科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:by_huang
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趋化因子是一类具有化学趋化功能的小分子分泌性蛋白, 能够引导白细胞到损伤或者感染的部位, 参与免疫调节和病理反应。为丰富鲆鲽鱼类趋化因子的相关基础研究, 本研究克隆了牙鲆(Paralichthys olivaceus)趋化因子基因CXCL9, 其全长为910 bp, 开放阅读框为408 bp, 编码135个氨基酸。该基因具有趋化因子超家族的典型特征, 在35、37、60和77个氨基酸位置具有4个保守的半胱氨酸残基, 形成两个二硫键。氨基酸序列分析表明, 该基因与大菱鲆(Scophthalmus maximus)、半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)的CXCL9基因具有较高的同源性, 分别为78.5%和71.0%。实时荧光定量PCR结果显示, CXCL9在正常牙鲆肝脏和脾脏中的表达量非常高, 在皮肤和鳃等组织中表达量次之, 说明CXCL9特异性地在免疫相关组织中表达。经迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)感染后, 牙鲆肝脏中CXCL9 mRNA表达量在感染后6 h即出现高峰值, 而头肾和脾脏中的高峰值出现较晚。经鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染后6 h, 牙鲆肝脏中CXCL9 mRNA的表达量升高近8倍, 头肾中的表达高峰值出现在感染后24 h, 而脾脏中CXCL9 mRNA的表达量在感染后6 h迅速升高10倍, 逐渐降低后48 h又出现高峰, 为正常水平的20倍。上述研究结果说明CXCL9基因在病原菌感染过程中有快速响应, 可能参与了免疫防御过程, 将有可能发展为一种牙鲆细菌性疾病的生物标记。本研究为牙鲆趋化因子超家族免疫机制的深入研究奠定了基础。
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