【摘 要】
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目的克隆和筛选白血病多药耐药(MDR)相关基因.方法以MDR白血病细胞株K562/DOX为检测样本,以K562细胞株为驱赶样本(对照),应用抑制性消减杂交(SSH)技术分离和克隆K562/DOX细胞中过高表达的基因,构建cDNA消减文库;通过反向Northern斑点杂交法进一步筛选消减文库,对阳性克隆进行序列测定和同源性分析;并采用RT-PCR和Northern blot方法对某些阳性克隆进行进一
【机 构】
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310006,杭州,浙江省中医院血液科,浙江大学肿瘤研究所
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目的克隆和筛选白血病多药耐药(MDR)相关基因.方法以MDR白血病细胞株K562/DOX为检测样本,以K562细胞株为驱赶样本(对照),应用抑制性消减杂交(SSH)技术分离和克隆K562/DOX细胞中过高表达的基因,构建cDNA消减文库;通过反向Northern斑点杂交法进一步筛选消减文库,对阳性克隆进行序列测定和同源性分析;并采用RT-PCR和Northern blot方法对某些阳性克隆进行进一步的验证.结果发现了11个在K562/DOX细胞中高表达的基因,包括S3核糖体蛋白(S3 ribosomal protein,S3rp)基因、尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位2(NADH dehydrogenase subunit2,ND2)基因、My023基因等,其中多数基因与肿瘤MDR的关系尚未见报道.结论筛选到几个可能与白血病MDR形成有关的基因,提示了白血病MDR发生的新机制.
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