研究鼠李唐乳杆菌(LGG)对酒精性肝损伤Treg/Th17免疫调节作用及TLR通路的表达变化，为酒精性肝损伤早期治疗提供依据。
方法10周龄雄性C57/BL6小鼠根据随机数字表均分为对照组、乙醇组和LGG＋乙醇组，每组6只。乙醇组小鼠用含有5%乙醇的Lieber-DeCarli液体饲料喂养10 d，第11天清晨按小鼠体质量5 g/kg予40%乙醇灌胃9 h后处死；对照组小鼠用不含乙醇的Lieber-DeCarli液体饲料喂养相同时间后予5%麦芽糖灌胃9 h后处死；LGG＋乙醇组小鼠用LGG菌液(LGG>1 mL/d)加含5%乙醇的Lieber-DeCarli液体饲料喂养相同时间后，予40%乙醇灌胃9 h后处死。收集各组小鼠肝组织行HE和油红O染色，观察组织病理改变。检测各组小鼠血清ALT、AST含量。RT-PCR检测各组小鼠肠道紧密连接蛋白ZO-1、occludin和claudin-1 mRNA表达。Western免疫印迹法检测各组小鼠肝脏TLR4、髓样分化因子88 (MyD88)、IL-1受体相关激酶(IRAK-1)、核因子-κB和TNF-α蛋白表达。流式细胞仪分析LGG对小鼠脾脏Treg/Th17平衡的影响。各组间的统计分析用单因素方差分析和多重比较分析。
结果HE染色和油红O染色示，经LGG干预后小鼠肝脏内脂滴数量和大小明显改善。乙醇组ALT为(147.0±42.1) U/L，AST为(373.5±169.7) U/L，对照组分别为(56.8±15.3) U/L和(211.5±57.8) U/L，LGG＋乙醇组分别为(75.3±150.2) U/L和(211.7±36.3) U/L，各组间相比差异均有统计学意义(F值分别为19.474和4.702，P值分别为0.000和0.026)。乙醇组肠道紧密连接蛋白ZO-1、occludin和claudin-1 mRNA表达明显低于对照组，LGG＋乙醇组紧密连接蛋白表达增加(F值分别为149.219、145.561和154.237，均P＝0.000)。乙醇组小鼠肝脏内大肠埃希菌蛋白表达高于对照组，LGG＋乙醇组其表达减少(F＝130.317，P＝0.000)。乙醇组小鼠肝脏内TLR4、MyD88、IRAK-1、核因子-κB和TNF-α蛋白表达明显高于对照组，LGG＋乙醇组TLR4通路中各蛋白表达明显抑制。乙醇组小鼠脾脏中Treg所占比例明显低于对照组，LGG＋乙醇组小鼠Treg所占比例升高。乙醇组小鼠脾脏中Th17所占比例明显高于对照组，LGG＋乙醇组小鼠Th17所占比例降低。
结论LGG对酒精性肝损伤有保护作用，能够调节Treg/Th17平衡，抑制TLR4通路激活，为酒精性肝损伤早期治疗提供依据。