【摘 要】
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目的设计并合成新的靶向于雄激素受体(AR)的siRNA序列,转染前列腺癌细胞筛选最佳干扰序列。方法设计并合成靶向于雄激素受体的siRNA,以不同浓度转染雄激素非依赖性前列腺癌细
【机 构】
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第三军医大学西南医院超声科,第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,第三军医大学西南医院中心实验室,
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目的设计并合成新的靶向于雄激素受体(AR)的siRNA序列,转染前列腺癌细胞筛选最佳干扰序列。方法设计并合成靶向于雄激素受体的siRNA,以不同浓度转染雄激素非依赖性前列腺癌细胞C4-2,确定最佳转染浓度。以最佳转染浓度转染细胞,分为siRNAⅠ组、siRNAⅡ组、siRNAⅢ组、阴性对照组、空白对照组和无关对照组。RT-PCR检测AR mRNA表达水平,Western blot检测AR蛋白表达水平。CCK-8分析绘制细胞生长曲线,观察C4-2细胞生长活性并筛选出抑制效果最佳的siRNA靶序列。结果以不同浓度的AR siRNA转染C4-2细胞后,细胞生长活性降低(P<0.05),并筛选出100 nmol/L的最佳转染浓度;RT-PCR和Western blot结果显示转染后AR的mRNA和蛋白表达水平显著下降(P<0.05);CCK-8法检测结果显示各组细胞增殖活性显著降低,其中siRNAⅠ的抑制效果最为明显(P<0.05)。结论新设计合成的AR siRNA能通过沉默AR表达高效抑制C4-2细胞的增殖。
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