LncRNA TPT1-AS1在前列腺癌中的表达及对生物学功能的影响

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目的:研究长链非编码RNA (LncRNA)肿瘤蛋白翻译调节因子1(TPT1)-反义RNA1(AS1)对前列腺癌细胞增殖、侵袭的影响.方法:体外培养人正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)和前列腺癌细胞系雄激素非依赖f生前列腺癌(LNCaP)、DU-145、PC-3、22RV1,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各细胞系中LncRNA TPT1-AS1表达水平;选取表达差异最大的细胞系PC-3、DU-145,阳离子脂质体LipofectamineTM 2000瞬时转染si-RNATPT1-AS1阴性对照(si-RNA对照)组和siRNA-TPT1-AS1干扰(siRNA-TPT1-AS1干扰)组,不添加任何试剂设为空白对照组.qRT-PCR验证siRNA-TPT1-AS1转染情况;CCK-8检测TPT1-AS1-sh对细胞增殖的影响;Transwell检验TPT1-AS1-sh对细胞侵袭的影响;免疫印记(WB)法检测细胞TPT1蛋白的变化.结果:与正常前列腺细胞系RWPE-1相比,前列腺癌细胞系LNCaP、DU-145、PC-3、22RV1中TPT1-AS1的水平显著升高(P<0.05).在DU-145、PC-3中,空白对照组与si-RNA对照组中TPT1-AS1表达量、0,6,12,24,36,48 h各时期450 nm处的吸光度(A450)值、侵袭细胞数量、TPT1蛋白表达量差异均无统计学意义(P>0.05);与空白对照组、si-RNA对照组相比,siRNA-TPT1-AS1干扰组中TPT1-AS1表达量,24,36,48 h细胞A450值、细胞侵袭数量、TPT1蛋白表达量显著降低(P<0.05).在DU-145中,与空白对照组、si-RNA对照组相比,siRNA-TPT1-AS1干扰组12 h细胞A450值显著降低(P<0.05).结论:前列腺癌细胞系中TPT1-AS1表达上调;干扰前列腺癌细胞系DU-145、PC-3中TPT1-AS1可抑制细胞增殖、侵袭.
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