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钙网织蛋白重组腺病毒载体构建及体外表达

来源 :中国老年学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：itshuai

【摘 要】

：

目的构建钙网织蛋白（CRT）基因重组腺病毒载体,并检测其在293LP细胞中的表达。方法根据Genbank中提供的CRT基因序列,设计并合成引物,以人乳腺癌组织cDNA文库为模板采用RT-PCR技

【作 者】

：

赵丹 刘新莉 马萍 

【机 构】

：

中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所

【出 处】

：

中国老年学杂志

【发表日期】

：

2012年12期

【关键词】

：

钙网织蛋白(CRT) 腺病毒载体 基因治疗 

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目的构建钙网织蛋白（CRT）基因重组腺病毒载体,并检测其在293LP细胞中的表达。方法根据Genbank中提供的CRT基因序列,设计并合成引物,以人乳腺癌组织cDNA文库为模板采用RT-PCR技术扩增人CRT基因片段,测序后将CRT基因片段定向克隆至pShuttle-CMV重组穿梭载体,进而将穿梭载体克隆至PacⅠ限制性内切酶线性化的腺病毒载体pAdxsi。结果重组穿梭载体pShuttle-CRT经EcoRI/KpnⅠ酶切鉴定连接成功。酶切穿梭载体将CRT片段克隆至腺病毒载体pAdxsi得到Ad-CRT,

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