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目的
探讨ErbB3在骨肉瘤细胞Saos-2中的表达及其意义。
方法实时定量PCR检测骨肉瘤细胞Saos-2和正常人类成骨细胞N704中ErbB3 mRNA的表达水平,Western blotting检测ErbB3蛋白表达水平。使用短发夹RNA(shRNA)构建ErbB3表达沉默的Saos-2细胞,检测0~3 d内Saos-2细胞数目。测定ErbB3表达沉默和正常Saos-2细胞在0~100 μmol/L紫杉醇下48 h存活率。
结果相对于正常人类成骨细胞N704,骨肉瘤细胞Saos-2的ErbB3 mRNA表达量增加(4.15±0.04)倍,差异有统计学意义(t=7.31,P<0.05),且ErbB3蛋白水平显著增加。ErbB3沉默能降低Saos-2细胞的增殖水平,培养第3天ErbB3沉默的Saos-2细胞数目为(2.22±0.29)万个,而未沉默细胞数目为(4.58±0.41)万个,差异有统计学意义(t=8.23,P<0.05)。此外,ErbB3沉默能降低Saos-2细胞对紫杉醇的耐受,给药紫杉醇20 μmol/L时,ErbB3沉默组细胞存活率为(43.2±4.7)%,而未沉默组存活率为(61.4±5.9)%,差异有统计学意义(t=6.74,P<0.05)。
结论骨肉瘤细胞Saos-2高度表达ErbB3,ErbB3的表达可增强Saos-2细胞的增殖能力,同时增强Saos-2细胞对紫杉醇的耐受。