蛋氨酸诱导ApoE基因敲除小鼠主动脉不稳定斑块形成模型的研究

来源 :上海交通大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:myhululu
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目的通过2%(wt/vol)L-蛋氨酸负荷诱导ApoE基因缺陷小鼠,建立高同型半胱氨酸(Hcy)血症的动脉粥样硬化(AS)易损斑块模型。方法将60只6周龄C57BL/6J系ApoE基因缺陷小鼠随机分为三组,每组20只。对照组:给予同剂量饮用水灌胃;高蛋氨酸组:给予2%(wt/vol)L-蛋氨酸灌胃;极高蛋氨酸组:给予[3%(wt/vol)L-蛋氨酸灌胃。另设正常小鼠作为正常对照组(n=20)。1个月和2月后分别测定血清Hcy和血脂变化,并通过斑块HE、VanGieson(EVG)弹性纤维染色和EVG苦味酸复红法胶原染色及anti-MAC3单克隆抗体标记来检测斑块大小、纤维帽厚度、胶原比例和炎症浸润程度的变化。TUNEL法检测主动脉血管组织中细胞凋亡情况。结果高蛋氨酸负荷可诱导ApoE基因缺陷小鼠AS易损斑块产生,且随负荷提高和时间延长程度加重,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);凋亡细胞在脂核区大量积聚;内皮细胞水肿变性;血管平滑肌细胞(SMCs)由收缩型向合成型转变,胞质疏松,水肿变性,内质网扩张,胞质内空泡增多以及肌丝溶解;并可见核固缩的凋亡SMCs。结论高蛋氨酸饮食可诱导apoE基因缺陷小鼠出现高Hcy血症,从而生成AS易损斑块。斑块内SMCs增生与凋亡现象并存。
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