小鼠肥大细胞蛋白酶4的原核表达和多克隆抗体制备

来源 :合肥工业大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：zeroxu001

【摘要】

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文章构建小鼠肥大细胞蛋白酶4（mMCP-4）原核表达体系，获得原核表达蛋白，并制备兔抗mMCP-4多克隆抗体，提取小鼠脾细胞总RNA，运用RT-PCR技术获得目的基因mMCP-4，构建重组原核表达载体pE

【作者】

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刘璐刘健

【机构】

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合肥工业大学生物与食品工程学院

【出处】

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合肥工业大学学报(自然科学版)

【发表日期】

：

2013年10期

【关键词】

：

肥大细胞蛋白酶4(mMCP-4) 原核表达多克隆抗体 mast cell protease-4（mMCP-4） prokaryotic expressio

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文章构建小鼠肥大细胞蛋白酶4（mMCP-4）原核表达体系，获得原核表达蛋白，并制备兔抗mMCP-4多克隆抗体，提取小鼠脾细胞总RNA，运用RT-PCR技术获得目的基因mMCP-4，构建重组原核表达载体pET28a-mMCP-4，将其转化到大肠杆菌BL21中诱导表达。mMCP-4融合蛋白经Ni亲和层析法纯化后，作为抗原免疫兔子获得mMCP-4多克隆抗体。采用ELISA法测抗体效价，westernblot检测抗体特异性。结果表明，构建重组表达质粒pET28a-mMCP-4，经大规模原核表达获得大量mMCP-4

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