NRG1-siRNA慢病毒载体的构建

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目的 构建神经调节蛋白1(NRG1)-小干扰RNA (siRNA)慢病毒载体.方法 将NRG1干扰序列构建入线性化的慢病毒载体GV123上,得到NRG1-siRNA慢病毒载体.将重组病毒质粒包装和浓缩,并在293T细胞中测定病毒滴度.然后转染体外培养的星形胶质细胞,72 h时分别采用RT-PCR法和Western blot法检测NRG1 mRNA及其蛋白表达水平.结果 成功构建NRG1-RNAi慢病毒载体GV123-siRNA,病毒滴度为8×108 TU/ml,该病毒转染星形胶质细胞后,NRG1 mRNA及其蛋白表达均下调.结论 成功构建了NRG1-siRNA慢病毒载体。

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