【摘 要】
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本研究首次报道了发根农杆菌介导的向日葵遗传转化和毛状根形成的优化条件。由发根农杆菌诱导向日葵子叶和下胚轴形成的根在含卡那霉素(200 mg/L,kanamycin)的选择培养基(1/2
【机 构】
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华南师范大学生命科学学院广东省植物发育生物工程重点实验室,华南师范大学生命科学学院广东省植物发育生物工程重点实验室,华南师范大学生命科学学院广东省植物发育生物工程重点实验室 广东广州510631,中国
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本研究首次报道了发根农杆菌介导的向日葵遗传转化和毛状根形成的优化条件。由发根农杆菌诱导向日葵子叶和下胚轴形成的根在含卡那霉素(200 mg/L,kanamycin)的选择培养基(1/2 MS)上选择,12 d后存活的根转到无激素培养基上能快速生长,经分子检测证实其为毛状根。同时着重研究了不同诱导条件对向日葵毛状根形成的影响。结果发现适用于毛状根形成的最优条件为菌株R1205,菌液浓度(OD600)1.0,15 min感染,共培养3 d,培养基pH 6.5,30μmol/L乙酰丁香酮(acetosyingone)。在此条件下,子叶和下胚轴的毛状根形成率分别达到23.7%和81.6%。
This study reports the first report of Agrobacterium rhizogenes-mediated sunflower genetic transformation and hairy root formation optimization conditions. Roots formed by Agrobacterium rhizogenes-induced cotyledon and hypocotyls of sunflower were selected on selection media (1/2 MS) containing kanamycin (200 mg / L, kanamycin) and survived after 12 days Hormone-free medium can grow rapidly, confirmed by molecular testing hairy roots. At the same time, the effects of different inducing conditions on the hairy root formation of sunflower were studied emphatically. The results showed that the optimal conditions for hairy root formation were strain R1205. The bacterial cells were infected with OD600 for 1.0 and 15 min, and cultured for 3 days. The medium was pH 6.5 and 30 μmol / L acetosyingone. Under this condition, the rate of hairy root formation in cotyledons and hypocotyls reached 23.7% and 81.6% respectively.
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