微小RNA-486在造血细胞红系分化中的表达研究

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目的微小RNA(microRNA,miRNA)参与造血干细胞增殖分化的调节。微小RNA-486(microRNA-486,miR-486)是人胎肝组织中表达丰度较高的miRNA,但其在造血细胞分化的表达及其对分化的调控作用并不清楚。本研究旨在观察miR-486在造血细胞分化中的表达变化及调控。方法利用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-QPCR)方法检测了小鼠各组织miR-486的表达情况。分离人脐带血CD34+细胞,并在含有不同造血生长因子组合的培养体系中进行分化诱导:利用流式细胞仪检测造血细胞分化效率,并用RT-QPCR检测miR-486的表达。采用慢病毒介导的GATA1沉默策略抑制CD34+细胞的红系分化并检测miR-486的表达。结果 RT-QPCR检测了miR-486在正常小鼠各组织的表达情况,证明其在造血细胞中表达量最高。在脐带血CD34+细胞的体外定向诱导分化过程中,随着细胞向红系分化,miR-486表达增高。慢病毒介导的GATA1-小发夹RNA(shRNA)转染能够沉默脐带血CD34+细胞GATA1的表达,并阻断其向红系分化,同时,miR-486的表达水平也明显降低。结论 miR-486是一种与红系造血分化密切相关的miRNA。
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