【摘 要】
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目的：建立巴斯德杆菌的CODEHOP PCR快速检测方法,为实验动物的呼吸道细菌的控制提供参考.
方法：应用CODEHOP在线简并引物设计工具,比对Genbank中13株巴斯德杆菌的RNA聚合酶
【机 构】
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中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所,北京100050中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心,昆明650118
【出 处】
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2017年第十五届中国北方实验动物科技年会
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目的：建立巴斯德杆菌的CODEHOP PCR快速检测方法,为实验动物的呼吸道细菌的控制提供参考.
方法：应用CODEHOP在线简并引物设计工具,比对Genbank中13株巴斯德杆菌的RNA聚合酶β亚基(rpoB)氨基酸序列设计简并引物.对建立CODEHOP PCR方法用21株参考菌株进行特异性和敏感性评价,并应用于实验动物中的巴斯德杆菌检测.
结果：简并引物PastF6/PastR5扩增标准菌株的目的片段为200bp左右.能够区分受试的巴斯德杆菌和主要的实验动物呼吸道病原菌.敏感性为0.2pg/μL～2pg/μL.在受试的609只实验动物中呼吸道样品中检测出巴斯德杆菌阳性率为19.1％.样品阳性片段经测序验证,准确率为100％.
结论：所建立的方法具有良好的特异性和敏感性,可用于动物样品中巴斯德杆菌的检测.
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