【摘 要】
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为了研究奶牛乳腺防御素基因的表达调控机制,采用逆转录-聚合酶链式反应( RT-PCR)扩增出LAP基因的核心片段序列,并与NCBI数据库序列比对同源性;进一步扩增其DNA序列中间片段;
【机 构】
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内蒙古农业大学动物胚胎与发育生物学研究室,内蒙古呼和浩特,010018;内蒙古农业大学动物胚胎与发育生物学研究室,内蒙古呼和浩特010018;内蒙古医学院基础医学院,内蒙古呼和浩特010059;
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为了研究奶牛乳腺防御素基因的表达调控机制,采用逆转录-聚合酶链式反应( RT-PCR)扩增出LAP基因的核心片段序列,并与NCBI数据库序列比对同源性;进一步扩增其DNA序列中间片段;其后运用反向PCR技术并结合半巢式PCR技术扩增其侧翼的序列.结果表明:序列与NCB(1)数据库中序列同源性为100％,确认为LAP基因;DNA序列扩增得到1 760 bp的中间序列,并预测了其酶切位点;得到5 侧翼序列107bp,3侧翼序列87 bp,经预测发现有转录因子GATA.为进一步研究防御素的防御功能、寻找防御素基因体外表达调控机制以及利用基因工程防治奶牛乳腺炎积累了基本资料.
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