【摘 要】
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目的 探讨雷公藤甲素(TP)诱导慢性粒细胞白血病(CML) K562/G01细胞凋亡的线粒体可能机制.方法 用不同浓度的TP作用于K562/G01细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各实验组的细胞毒性作用,用流式细胞术检测各实验组细胞的凋亡率、线粒体膜电位及Caspase-9活性,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测Caspase-9及细胞色素C的mRNA水平,用Western blot检
【机 构】
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030001太原,山西医科大学研究生院,山西医科大学附属大医院血液科,山西医科大学附属大医院血液科,山西医科大学附属大医院血液科
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目的 探讨雷公藤甲素(TP)诱导慢性粒细胞白血病(CML) K562/G01细胞凋亡的线粒体可能机制.方法 用不同浓度的TP作用于K562/G01细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各实验组的细胞毒性作用,用流式细胞术检测各实验组细胞的凋亡率、线粒体膜电位及Caspase-9活性,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测Caspase-9及细胞色素C的mRNA水平,用Western blot检测细胞色素C的蛋白水平.结果 TP对K562/G01细胞的生长增殖均有抑制作用,呈时间-剂量依赖性(均P＜ 0.001).同时TP可以使细胞的线粒体膜电位消退、使Caspase-9的活性增高(均P＜ 0.001),TP上调Caspase-9和细胞色素C的转录水平(均P＜0.001)及细胞色素C的蛋白表达水平(0、10、20、40、80 nmol/LTP作用48 h后,细胞色素C对应条带灰度值分别为10.54±0.75、21.54±0.59、39.63±0.58、53.29±1.47、75.68±1.87,均P＜ 0.001),且上述作用均呈明显的剂量依赖性.结论 雷公藤甲素可以有效抑制K562/G01细胞生长增殖,而线粒体凋亡途径很可能是TP促进CML细胞凋亡的多途径之一。
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