【摘 要】
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目的探讨miR-216b在肾透明细胞癌细胞增殖和侵袭中的作用及机制。方法培养肾透明细胞癌细胞株(769-P、Caki-1和786-O)和正常人胚肾细胞(293T)。qRT-PCR检测miR-216b在肾透明
【机 构】
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西南医科大学附属中医医院肾内科,西南医科大学,成都医学院
【基金项目】
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四川省科技厅支撑计划(14ZC0027);四川省科技厅项目(2011JTD0014,17TD0046)
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目的探讨miR-216b在肾透明细胞癌细胞增殖和侵袭中的作用及机制。方法培养肾透明细胞癌细胞株(769-P、Caki-1和786-O)和正常人胚肾细胞(293T)。qRT-PCR检测miR-216b在肾透明细胞癌细胞中的表达;对769-P和786-O进行mimic NC和miR-216bmimic转染,CCK-8和Transwell小室实验检测miR-216b上调对Caki-1细胞增殖和侵袭的影响;Western blot检测肾透明细胞癌细胞中FGFR1蛋白的表达;双荧光素酶报告实验和Western blot验证miR-216b对FGFR1的调控关系;在miR-216b上调的Caki-1细胞中过表达FGFR1,CCK-8和Transwell小室实验检测miR-216b是否通过FGFR1调节Caki-1细胞增殖和侵袭。结果与293T相比,miR-216b在肾透明细胞癌细胞中的表达明显下调(P<0.01);miR-216b上调明显抑制肾透明细胞癌细胞增殖和侵袭(P<0.01);与293T相比,FGFR1在肾透明细胞癌细胞中的蛋白表达明显上调;荧光素酶报告实验和Western blot结果表明miR-216b直接靶向FGFR1 3′UTR并抑制其表达;上调FGFR1的表达可以逆转miR-216b对Caki-1细胞增殖和侵袭的抑制作用。结论 miR-216b可以通过FGFR1抑制肾透明细胞癌细胞的增殖和侵袭,在肾透明细胞癌中发挥抑癌基因功能。
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