多药耐药基因在人骨髓CD34+细胞中的表达及对化疗药物的耐受性

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目的 探讨人多药耐药(MDR1)基因过表达能否提高骨髓造血干/祖细胞对化疗药物的耐受性.方法应用免疫磁性分选系统(miniMACS)体外分离、纯化骨髓CD34+细胞并进行扩增;采用脂质体介导的基因转移方法,将人MDR1基因转染骨髓CD34+细胞,并运用流式细胞术检测基因转导前后造血干/祖细胞中MDR1基因的编码产物-Pl70糖蛋白表达和功能变化.MTT法检测基因转导前后造血干/祖细胞对化疗药物耐受性的改变.结果 MDR1基因转导后48 h骨髓造血干/祖细胞Pl70抗原表达为(23.6±2.34)%,明显高于转导前(11.2±2.2)%(P<0.01).P170的功能活性被Rh-123的摄取和排除试验证实.转基因后细胞表现为典型的多药耐药表型,对P170谱的多种化疗药的耐受性提高了约2~8倍,对非P170谱的顺铂、氨甲喋呤耐受性没有改变. 结论人多药耐药基因能提高骨髓造血干/祖细胞对多种化疗药物的耐受性,表现为典型的多药耐药表型。

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