论文部分内容阅读
研究淫羊藿苷(icariin,ICA)联合碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对大鼠外周血间充质干细胞(rat peripheral blood mesenchymal stem cells,rPBMSCs)增殖、衰老及自我更新的影响.分离、培养并鉴定rPBMSCs;取第3代rPBMSCs用于后续研究.实验分为4组:对照组;ICA组;bFGF(20 ng/mL bFGF)组;联合(ICA和bFGF)组.CCK-8检测结果表明,ICA在浓度为10-6 mol/L时,显著促进rPBMSCs增殖,并将该浓度用于后续试验.采用CCK-8法测定各组rPBMSCs吸光度并制作出生长曲线,4组细胞生长曲线均近似“S”形,7d时,相比于对照组,ICA组、bFGF组和联合组细胞OD值显著增加,差异有统计学意义(P＜0.05),相比于ICA组和bFGF组,联合组rPBMSCs OD值进一步显著增加,差异有统计学意义(P＜0.05).β-半乳糖苷酶染色检测结果表明,相比于对照组,ICA组和bFGF组衰老百分比显著降低(P＜0.05),相比于ICA组和bFGF组,联合组rPBMSCs衰老百分比显著下降(P＜0.05).多潜能分化检测结果证明,ICA联合bFGF明显提高rPBMSCs体外诱导成软骨、成骨和成脂的能力.Western印迹检测结果显示,ICA和bFGF单独作用均能促进PCNA、Nanog和Oct4蛋白质表达(P＜0.05),抑制p16、p21和p53蛋白质表达(P＜0.05),而ICA和bFGF联合作用效果更显著(P＜0.05).综上所述,ICA联合bFGF通过促进rPBMSCs增殖,维持干性,延缓衰老维持自我更新.