CD-14和Tool样受体在牙髓卟啉单胞菌脂多糖诱导成骨细胞白细胞介素6表达中的作用

来源 :中华口腔医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yipan1975
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目的 探讨CD-14和Tool样受体(Toll like receptors,TLR)在牙髓卟啉单胞菌(Porphyromonas endodontalis,Pe)脂多糖诱导小鼠成骨细胞白细胞介素6(IL-6)表达中的作用。方法用10 mg/L的Pe-脂多糖分别作用于小鼠成骨细胞MC3T3-E1不同时间,未加Pe-脂多糖的MC3T3-E1为空白对照组。反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验检测细胞IL-6基因和蛋白的表达,RT-PCR和流式细胞术检测细胞表面CD-14、TLR-2及TLR-4基因和蛋白的表达变化。抗小鼠CD-14、TLR-2及TLR-4抗体预处理细胞后,采用RT-PCR法检测Pe-脂多糖诱导细胞IL-6mRNA表达的变化。应用SPSS 11.0统计软件对结果进行单因素方差分析Dunnett-t检验。结果Pe-脂多糖作用于细胞后,与空白对照组比较细胞IL-6 mRNA和蛋白的表达明显增加,6h时IL-6表达[(36.534±0.574) ng/L]显著高于空白对照组[(11.696±0.672)ng/L)],P<O.01;空白对照组中CD-14和TLR-4 mRNA呈弱表达,CD-14和TLR-4的阳性细胞率分别为(39.038±3.131)%和( 11.438±0.385)%,加入Pe-脂多糖后CD-14和TLR-4 mRNA表达明显增加,CD-14和TLR-4的阳性细胞率分别增加至(62.407±1.800)%和(21.367±2.271)%,但TLR-2的表达未见明显变化;中和抗体实验证明CD-14或TLR-4抗体均可部分抑制细胞IL-6 mRNA的表达,TLR-2抗体则无此作用。结论Pe-脂多糖作用于成骨细胞MC3T3-E1诱导其炎症因子IL-6的产生依赖于CD-14和TLR-4受体,与TLR-2无关。
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