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探讨二仙汤（er-xian decoction， EXD）含药血清通过BK通道（BK channel）对氧化应激的MC3T3-E1细胞增殖及成骨分化的影响。构建H2O2诱导MC3T3-E1细胞氧化应激模型，使用3 mmol·L-1的氯化四乙基铵（tetraethylamine chloride， TEA）阻断MC3T3-E1细胞BK通道。将MC3T3-E1细胞分为对照（control）组、模型（model）组、EXD组、TEA组和TEA+EXD组。MC3T3-E1细胞按照分组分别处理2 d后，加入700 μmol·L-1 H2O2 继续培养2 h，CCK-8法检测细胞增殖活性，碱性磷酸酶（alkaline phosphatase， ALP）试剂盒法检测细胞ALP活力，蛋白免疫印迹法检测细胞蛋白表达，实时荧光定量PCR检测细胞mRNA表达，茜素红染色法检测成骨细胞矿化区域。结果显示，与control组相比，model组细胞增殖活性和ALP活力显著降低，BK通道α亚基（BK channel α subunit， BKα）、一型胶原（collagen Ⅰ， COL1）、骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic protein 2， BMP2）、骨保护素（osteoprotegerin， OPG）和磷酸化Akt表达水平下降，Runt相关转录因子2（Runt-related transcription factor 2， RUNX2）、BMP2和OPG mRNA表达水平降低，钙结节面积显著缩小；EXD含药血清干预可以显著提高细胞增殖活性和ALP活力，上调BKα、COL1、BMP2、OPG和磷酸化的丝氨酸-苏氨酸激酶（serine-threonine kinase， Akt）、叉头框转录因子O亚族1（forkhead box protein O1， FoxO1）蛋白表达，促进RUNX2、BMP2和OPG mRNA表达，增大钙结节面积；而TEA阻断BK通道后，EXD含药血清促进BKα、COL1、BMP2、OPG和磷酸化Akt、FoxO1蛋白表达，提高RUNX2、BMP2和OPG mRNA表达，增大钙结节面积的作用被逆转。EXD含药血清能改善氧化应激的MC3T3-E1细胞增殖活性、成骨分化和矿化能力，其机制与调控BK通道以及下游Akt/FoxO1信号通路有关。