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目的构建促凋亡基因p53上调凋亡调制物（Pu—MA）的真核表达载体和针对其磷酸化位点定点突变的真核表达载体，为进-步研究其功能奠定基础。方法通过PCR方法从pCEP4．（HA）：-PUMA质粒中扩增PUMA基因，并克隆到pIRES2-EGFP载体上，构建PUMA真核表达载体pIRES2-EGFP-（HA）：-PUMA，利用定点突变技术构建pIRES2-EGFP-（HA）：-PUMA—T28G，行PCR及测序鉴定；脂质体分别将两种质粒转染Hela细胞，同时设未转染的阴性对照组及转染空载体组（4个实验组）；P