目的:表达人survivin重组蛋白并制备单克隆抗体。方法:表达含有survivin基因的重组质粒pRSETB-survivin,表达人survivin重组蛋白,以此为抗原,常规方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与NS21细胞融合,得稳定分泌survivinmAb的杂交瘤细胞株,ELISA检测mAb的相对亲和力,Westernblot检测mAb的特异性。间接免疫荧光观察骨肉瘤细胞中survivin的表达情况。结果:重组载体pRSETB-survivin转化入大肠杆菌BL21中表达所得蛋白经Westernblot验证为目的蛋白。筛选出2株能稳定分泌特异性抗人survivin的mAb杂交瘤细胞株,免疫球蛋白亚类均为IgG类;单克隆抗体的亲和常数为S11.52×10-9mol/L,S22.31×10-9mol/L。Westernblot结果显示,2株单抗识别相对分子质量为20000的survivin单一条带,并发现在骨肉瘤细胞中survivin主要表达在胞浆内。结论:成功地表达出人survivin重组蛋白,制备出抗人survivinmAb,为进一步用于survivin的免疫学检测及骨肉瘤生物学治疗奠定了基础。