【摘 要】
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建立siRNA含量测定方法,用于阳离子脂质体中siRNA的含量和包封率测定。利用荧光染料SYBR Gold和Ribogreen与siRNA结合后能发出强烈荧光的原理,分别采用电泳法和荧光分光光度
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建立siRNA含量测定方法,用于阳离子脂质体中siRNA的含量和包封率测定。利用荧光染料SYBR Gold和Ribogreen与siRNA结合后能发出强烈荧光的原理,分别采用电泳法和荧光分光光度法测定脂质体中的siRNA含量,计算阳离子脂质体的包封率。SYBR Gold电泳法的检测线性范围为0.2~2.0μmol·L-1(R=0.9930),高、中、低3个浓度的回收率分别为96.35%、96.92%和100.74%(n=3);日内日间精密度的RSD均小于5%(n=5)。Ribogreen荧光分光光度法的检测线性范围为10~50nmol·L-1(R=0.9971),高、中、低3个浓度的回收率分别为98.22%、99.88%和99.64%(n=3);日内日间精密度的RSD均小于5%(n=5)。利用这两种方法所测得3批阳离子脂质体中siRNA平均含量分别为98.52%和97.85%,平均包封率分别为99.20%和96.45%,经方差分析,两种方法无显著性差异。两种方法准确可靠、稳定性高和方便实用,均可用于阳离子脂质体中siRNA的含量和包封率测定。
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